液相色譜柱在使用時(shí)有什么地方需要注意的?
發(fā)布日期:2021-06-14 瀏覽次數:742
液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出,通過(guò)檢測器時(shí),樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來(lái)。 1、柱效和保護柱
拿到一根新柱時(shí),一定要先看其使說(shuō)明,然后測柱效,定期檢測柱效,保留在新色譜柱上得到的色譜圖,并記錄條件,定期檢測儀器的譜帶展寬。若應用于在線(xiàn)監測,應對色譜柱提供在線(xiàn)的物理保護和化學(xué)保護,例如采取安裝在線(xiàn)過(guò)濾器,自裝填料保護柱和預裝保護柱等。在線(xiàn)過(guò)濾器的作用是防止顆粒在柱頭累計,優(yōu)點(diǎn)是基本不影響柱效,在需要高柱效的時(shí)候常用,常更換的消耗品是濾芯和墊圈保護柱的作用是防止柱子被化學(xué)污染。缺點(diǎn)是多數保護柱影響色譜柱的柱效,特別是在用微柱時(shí),常用的是普通自裝填料的保護柱。最近新出的一些保護柱例如Sentry-guard保護柱,它的特點(diǎn)是高質(zhì)量、高效填料、增加分析柱效、對臟樣品載荷能力大,能延長(cháng)保護柱的壽命,手可擰緊接頭,安裝時(shí)不需要工具,省時(shí)省,可換芯式設計,能采用各種不同的填料,主要適用于非常臟非常復雜的樣品本底,例如生化樣品,環(huán)境樣品和食品等,或者不想做太多的圃相萃取,不想降低柱效果等情況。
2、清洗
對所做的樣品要有充分的了解,用對該樣品洗脫能力*的流動(dòng)相清洗,對于硅膠柱,先用甲醇洗去極性雜質(zhì),然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100-20OraL依次活化,對于鍵和相柱,一般用甲醇一氯仿一甲醇一水依次沖洗,每種色譜柱有特定的清洗方法,一定要看其使用說(shuō)明。
3、存放
存放前除去雜質(zhì)和鹽,采用合適的存放溶劑,避免色譜柱床的干枯,避免機械振動(dòng),防止細菌生長(cháng),注意存放的溫度。